D-二聚體（D-Dimer）
抗體參數(shù)
| 名稱 | D-二聚體抗體（D-Dimer antibody） | ||
| 貨號 | K65f1 | K86d3 | R160c5 |
| 類型 | 單克隆抗體 | ||
| 宿主 | 小鼠 | ||
| 反應(yīng)物種 | 人 | ||
| 應(yīng)用平臺 推薦配對 |
化學發(fā)光 | 免疫層析 | 免疫比濁 |
| K65f1（捕獲）-R160c5（檢測） | K86d3（捕獲）-K65f1（檢測） | K65f1 | |
| 純度 | Protein A/G純化，純度>95% | ||
| 緩沖液 | 1xPBS，pH 7.4 | ||
| 儲存 | -20℃或更低溫度，分裝保存，避免反復(fù)凍融 | ||
抗原參數(shù)
| 名稱 | D-二聚體抗原（D-Dimer antigen） |
| 貨號 | C1564 |
| 種屬 | 人 |
| 類型 | 天然 |
| 純度 | >85%，評估來源于R250染色的SDS-PAGE膠 |
| 緩沖液 | 1xPBS，pH 7.4 |
| 儲存 | -80℃分裝保存，避免反復(fù)凍融 |
標記抗體及抗體偶聯(lián)磁珠
| 名稱 | 貨號 | 標記/偶聯(lián) | 推薦配對 | 推薦平臺 |
| D-二聚體（D-Dimer） 標記抗體 |
L34c1 | AE | R351e9（捕獲） L34c1/L35c1（檢測） |
化學發(fā)光（AE） |
| L35c1 | ALP | |||
| R351e9 | Biotin | |||
| D-二聚體（D-Dimer） 抗體偶聯(lián)磁珠 |
B33c1 | 羧基（COOH） 修飾磁珠 |
B33c1（捕獲） L34c1/L35c1（檢測） |
|
| B34c1 | 對甲苯磺?；═osyl） 修飾磁珠 |
B34c1（捕獲） L34c1/L35c1（檢測） |
||
| B35c1 | 鏈霉親和素（SA） 修飾磁珠 |
B35c1（捕獲） L34c1/L35c1（檢測） |
發(fā)光大包裝試劑
| 名稱 | 貨號 | 推薦平臺 | 方法學 |
| D-二聚體（D-Dimer）發(fā)光大包裝試劑 | DD02 | 化學發(fā)光（AE） | 夾心法 |
產(chǎn)品數(shù)據(jù)
1.西門子樣本符合率
用D-Dimer抗體（K65f1、R160c5）制成的化學發(fā)光大包裝試劑DD02，檢測71例西門子賦值血漿樣本（濃度范圍0.12-19.38mg/L FEU），樣本符合率（R2）為0.9895。
| 編號 | 樣本濃度 （mg/L FEU） |
檢測濃度 （mg/L FEU） |
| 1 | 0.12 | 0.20 |
| 2 | 0.18 | 0.24 |
| 3 | 0.29 | 0.22 |
| ? | ? | ? |
| 70 | 16.91 | 16.61 |
| 71 | 19.38 | 18.89 |
表1. D-Dimer臨床對比分析數(shù)據(jù)（西門子賦值）
圖1. D-Dimer臨床對比分析（西門子賦值）
2.最低檢測限
用DD02對零濃度稀釋液重復(fù)測定20次，計算最低檢測限。
| 名稱 | 濃度（mg/L FEU） | RLU平均值 | 線性方程 |
| 校準品S1 | 0 | 2298 | y=165500x+2298 |
| 校準品S2 | 0.05 | 10573 | |
| 20次重復(fù)測定零濃度稀釋液RLU值 | |||
| 2365 | 2598 | 2378 | 2655 |
| 2412 | 2436 | 2356 | 2487 |
| 2456 | 2466 | 2498 | 2566 |
| 2126 | 2365 | 2369 | 2485 |
| 2254 | 2488 | 2598 | 2666 |
| RLU均值 | 2451 | ||
| SD | 132.3 | ||
| 平均值+2SD | 2716 | ||
| 最低檢測限（mg/L FEU） | 0.003 | ||
表2. D-Dimer發(fā)光大包裝試劑最低檢測限
3.線性
將濃度為50.91mg/L FEU的西門子賦值高濃度樣本，用樣本稀釋液稀釋為40%、20%、10%、4%、0.4%和0.1%六個濃度。用DD02對高濃度樣本及六個稀釋樣本進行檢測，計算相關(guān)性。
| 百分比 | 濃度（mg/L FEU） | RLU | 絕對偏差 | 相對偏差 |
| 100% | 50.91 | 8475755 | / | -0.10% |
| 40% | 20.55 | 3562505 | / | 0.70% |
| 20% | 10.18 | 1884297 | / | -0.40% |
| 10% | 5.08 | 1058949 | / | -0.90% |
| 4% | 2.10 | 576686 | / | 1.40% |
| 0.4% | 0.231 | 42299 | -0.01 | / |
| 0.1% | 0.051 | 10839 | -0.03 | / |
| 相關(guān)性：0.99999 | ||||
表3. D-Dimer發(fā)光大包裝試劑線性
4.重復(fù)性
利用同一批DD02對濃度為0.516mg/L FEU和2.05mg/L FEU的西門子賦值樣本各重復(fù)檢測10次，其測量濃度變異系數(shù)（CV）均小于3%。
| 低值樣本 | ||
| 編號 | RLU | 濃度（mg/L FEU） |
| 1 | 100755 | 0.512 |
| 2 | 97663 | 0.498 |
| 3 | 98986 | 0.504 |
| 4 | 95686 | 0.489 |
| 5 | 101864 | 0.517 |
| 6 | 100091 | 0.509 |
| 7 | 101198 | 0.514 |
| 8 | 94154 | 0.482 |
| 9 | 102975 | 0.522 |
| 10 | 96125 | 0.491 |
| 平均值 | / | 0.504 |
| 標準差 | / | 0.013 |
| CV | 2.6% | |
表4. D-Dimer發(fā)光大包裝試劑重復(fù)性（低值）
| 高值樣本 | ||
| 編號 | RLU | 濃度（mg/L FEU） |
| 1 | 487103 | 2.01 |
| 2 | 504926 | 2.08 |
| 3 | 514998 | 2.12 |
| 4 | 492221 | 2.03 |
| 5 | 497318 | 2.05 |
| 6 | 481965 | 1.99 |
| 7 | 484537 | 2.00 |
| 8 | 494772 | 2.04 |
| 9 | 504926 | 2.08 |
| 10 | 487103 | 2.01 |
| 平均值 | / | 2.04 |
| 標準差 | / | 0.042 |
| CV | 2.05% | |
表5. D-Dimer發(fā)光大包裝試劑重復(fù)性（高值）
5.準確度
將濃度為2.02mg/L FEU的西門子賦值高濃度樣本，按照1：9的體積比加入到濃度為0.501mg/L FEU的低濃度血清中，配制成濃度為0.653mg/L FEU的回收樣品，用DD02進行檢測，計算回收率。
| 待測物 | 測定濃度（mg/L FEU） | RLU | 濃度平均值（mg/L FEU） |
| 高濃度樣本 | 2.05 | 497319 | 2.06 |
| 2.10 | 509973 | ||
| 2.03 | 492222 | ||
| 低濃度血清 | 0.489 | 95686 | 0.50 |
| 0.495 | 97003 | ||
| 0.501 | 98324 | ||
| 回收樣品 | 0.632 | 48506 | 0.65 |
| 0.654 | 48617 | ||
| 0.651 | 49581 | ||
| 回收率 | 97.17% | ||
表6. D-Dimer發(fā)光大包裝試劑回收率
6.熱穩(wěn)定性
將DD02試劑組份分別放置于37℃培養(yǎng)箱和4℃冰箱中加速7天，分別測試高、低值質(zhì)控品，比較其偏差。
| 低值質(zhì)控品 | ||||
| 編號 | RLU | 濃度（mg/L FEU） | ||
| 4℃7天 | 37℃7天 | 4℃7天 | 37℃7天 | |
| 1 | 98324 | 94154 | 0.501 | 0.482 |
| 2 | 97883 | 94810 | 0.499 | 0.485 |
| 3 | 98765 | 96564 | 0.503 | 0.493 |
| 偏差 | -3.3% | -2.9% | ||
表7. D-Dimer發(fā)光大包裝試劑熱穩(wěn)定性（低值）
| 高值質(zhì)控品 | ||||
| 編號 | RLU | 濃度（mg/L FEU） | ||
| 4℃7天 | 37℃7天 | 4℃7天 | 37℃7天 | |
| 1 | 94154 | 98324 | 2.04 | 1.89 |
| 2 | 94810 | 97883 | 2.01 | 1.92 |
| 3 | 96564 | 98765 | 1.99 | 1.95 |
| 偏差 | -3.2% | -4.9% | ||
表8. D-Dimer發(fā)光大包裝試劑熱穩(wěn)定性（高值）
西門子樣本符合率
用D-Dimer抗體（K65f1、R160c5）制成的化學發(fā)光試劑，檢測40例西門子賦值血漿樣本（濃度范圍0.21-16.62mg/L FEU），樣本符合率（R2）為0.9921。
| 編號 | 樣本濃度 （mg/L FEU） |
檢測濃度 （mg/L FEU） |
| 1 | 0.21 | 0.27 |
| 2 | 0.33 | 0.31 |
| 3 | 0.35 | 0.45 |
| ? | ? | ? |
| 39 | 10.32 | 11.54 |
| 40 | 16.62 | 17.31 |
表9. D-Dimer臨床對比分析數(shù)據(jù)（西門子賦值）
圖2. D-Dimer臨床對比分析（西門子賦值）
西門子樣本符合率
用D-Dimer抗體（K86d3、K65f1）制成的試紙條，檢測28例西門子賦值血漿樣本（濃度范圍0.16-14.6mg/L FEU），樣本符合率（R2）為0.9653。
| 編號 | 樣本濃度 （mg/L FEU） |
檢測濃度 （mg/L FEU） |
| 1 | 0.16 | 0.15 |
| 2 | 0.29 | 0.37 |
| 3 | 0.43 | 0.35 |
| ? | ? | ? |
| 27 | 13.5 | 14.92 |
| 28 | 14.6 | 16.44 |
表10. D-Dimer臨床對比分析數(shù)據(jù)（西門子賦值）
圖3. D-Dimer臨床對比分析（西門子賦值）
試用申請
D-dimer臨床診斷意義
D-二聚體（D-dimer）來源于纖溶酶溶解的交聯(lián)纖維蛋白凝塊，是纖維蛋白單體經(jīng)活化因子ⅩⅢ交聯(lián)后，再經(jīng)溶酶水解所產(chǎn)生的一種特異性降解物質(zhì)，是特異性的纖溶過程標記物。在止血與血栓過程中，凝血酶水解血漿纖維蛋白原形成纖維蛋白單體，纖維蛋白單體聯(lián)接為纖維蛋白；同時凝血酶活化因子ⅩⅢ使纖維蛋白交聯(lián)；最后在纖溶酶的作用下，纖維蛋白降解成各種纖維蛋白降解產(chǎn)物(FDP)，其中最小的片段為D-二聚體，分子量約62ku，在體內(nèi)半衰期約3h，主要經(jīng)腎臟排泄或經(jīng)網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)破壞。
D-二聚體主要反映纖維蛋白溶解功能。D-二聚體血漿中水平增高說明存在繼發(fā)性纖溶過程。纖溶蛋白降解產(chǎn)物中，只有D-二聚體交聯(lián)碎片可以反應(yīng)血栓形成后的溶栓活性。因此，D-二聚體的定量檢測可以定量反應(yīng)藥物的溶栓效果以及可用于診斷、篩選新形成的血栓。正常人血漿D-dimer水平為<0.5μg/ml。
D-dimer測定簡便快速，有很高的敏感性，在臨床上已獲得普遍應(yīng)用，其最大價值是陰性結(jié)果作為對可疑靜脈血栓栓塞（VTE）患者的排除診斷標準以及作為彌漫性血管內(nèi)凝血（DIC）實驗室診斷的必須標準之一。在動脈血栓、腫瘤與內(nèi)、外、婦科、兒科多種疾病中，D-dimer可作為輔助診斷的指標。
參考文獻
[1] pmhdev. D-dimer for the exclusion of acute venous thrombosis and pulmonary embolism: a systematic review.[J]. 2004, 140(8):589.
[2] Y.-Q. Zhang, S.-M. Xie, W.-A. Wang. Diagnosis and treatment of a case of pulmonary embolism with normal D-dimer[J]. Journal of Shanghai Jiaotong University (Medical Science), 2019, 39(1):106-108.
[3] 李丹丹[1, 2], 馬聰[2]. D-二聚體檢測的臨床應(yīng)用進展[J]. 血栓與止血學, 2011(3).
相關(guān)產(chǎn)品
蘇公網(wǎng)安備32011202001302